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本制品源自Lachnospiraceae bacterium，在蛋白两端分别加了核定位信号（NLS），当Cas12a以NLS序列表达时，Cas12a-RNP复合体可以在进入细胞后立即定位到细胞核。无需体内转录或翻译，提高了该方法在质粒系统上的效率。另外，本制品还具有一种trans切割的活力，即一旦靶标dsDNA、crRNA和Cas12a蛋白形成三元复合体时，特异性切割靶标dsDNA的同时，会非特异切割体系中其他的ssDNA。这促使Cas12a可以作为一种新型的基因检测和成像的工具。

CRISPR相关蛋白Cas9已经广泛应用于基因组编辑，相比于Cas9蛋白，Cas12a具有类似的基因组编辑效率，但具有较低的脱靶效率，在基因治疗应用中具有巨大的潜力。

不同于Cas9蛋白，Cas12a不需要tracrRNA，只需要单个由41～44nt核苷酸组成的crRNA引导。与Cas9需要富含G的PAM相反，Cas12a-crRNA复合物通过识别富含T（5'-TTTN-3'）的PAM基序来切割靶DNA。Cas12a执行剪切后的DNA双链断裂引入了4或5个核苷酸突出的粘性末端。

• 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除；
  
• 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入；
  
• sgRNA剪切靶点DNA效率检测，降低体内筛选成本；
  
• 体外剪切靶DNA的特异位点。

• 纯蛋白体系，避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰；
  
• 可显著降低脱靶效应。

• 体外切割靶标dsDNA
  
  • 按下表加入各成分配制反应体系
    

    成分	用量
    10×Cas12a-dsDNA Buffer I	2μL
    靶标dsDNA(200nM)	1μL
    sgRNA(15μM)	1μL
    LbaCas12a Nuclease	2～8pmol
    RNase-Free Water	至20μL

    • LbaCas12a Nuclease（150ng=1pmol）。
      
    • 在反应体系中可添加RNase Inhibitor至1U/μL，防止dsDNA不纯导致sgRNA的降解。
  • 37℃保温1h，70℃反应10min。
• 体外切割探针ssDNA
  
  • 按下表加入各成分配制反应体系
    

    成分	用量
    10×Cas12a-ssDNA Buffer II	2μL
    靶标dsDNA(35nM)	2μL
    sgRNA(350nM)	2μL
    探针ssDNA(10μM)	0.5μL
    LbaCas12a Nuclease	1～4pmol

    • 推荐Cas12a∶gRNA∶DNA的摩尔比为15∶10∶1这样可获得最佳的切割效率。
  • 37℃每30～60s收集一次荧光，80～99cycles。